肿瘤细胞的增殖和凋亡是肿瘤细胞发展的重要因素,当机体正常调控机制发生紊乱时,肿瘤细胞的增殖能力将快速增强,而肿瘤细胞的转移作为恶性肿瘤的特征之一,其中细胞的迁移是促进肿瘤细胞浸润和转移的重要因素。化疗药物在临床中广泛应用,但不良反应严重,中药在肿瘤的治疗中正发挥其独特的优势。
三叶青是我国独有的珍贵植物,以块根或全叶入药,含有黄酮、花青素类等成分,具有抗肿瘤、抗炎,治疗哮喘、风湿和免疫调节等多种功效。有学者指出,三叶青对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用。三叶青提取物对肺癌A549细胞有良好的抑制作用,可诱导细胞凋亡;三叶青水提物对人宫颈癌细胞Hela229和人恶性黑色素瘤细胞A375体外抑制作用确切。有医者在乳腺癌患者治疗过程中辅以三叶青,其可清热解毒、消肿散瘀,结果发现三叶青治疗乳腺癌有一定的疗效。
三叶青,又名蛇附子,属葡萄科植物,《中药大辞典》记载其具有清热解毒、祛风止痛等功效,临床常用来治疗高热惊厥、肺炎、支气管炎、咽喉炎等疾病。有学者研究指出,三叶青提取物对人黑色素瘤细胞、人宫颈癌细胞、胃癌细胞和膀胱癌细胞具有抑制作用。本期报道三叶青有效部位的提取物对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和迁移的抑制作用的研究。
一、结果与分析
1.1各组对MCF-7细胞增殖的抑制作用
与阴性对照组对比,三叶青有效部位5~160g/L各剂量组和阳性对照组对MCF-7细胞增殖有显著抑制作用(P<0.01),且随着浓度的增大,三叶青有效部位对MCF-7细胞的抑制率呈剂量依赖性关系。三叶青对MCF-7细胞增殖的IC50值为(22.35±1.02)g/L,结果见表1。
1.2各组LDH活力检测结果
与阴性对照组对比,当给药浓度为160g/L时,LDH活力明显增加(P<0.05)。见表2。
1.3各组对MCF-7细胞迁移距离的作用
与阴性对照组对比,经药物处理48h后,随着剂量的增大,MCF-7细胞的迁移能力被明显抑制(P<0.05,P<0.01),呈明显的剂量依赖性。见表3。
1.4各组对MCF-7细胞周期和凋亡的影响
与阴性对照组对比,三叶青有效部位作用后,随着给药浓度的增大,G0/G1期细胞比例降低,S期和G2/M期细胞比例增大,凋亡率升高(P<0.01)。结果见表4。
二、讨论
本研究结果发现三叶青有效部位对MC-7细胞增殖的抑制作用,且随浓度的增大而逐渐增大,MCF-7细胞的IC50值为(22.35±1.02)g/L,当给药浓度为160g/L时,LDH活力增大,提示出现细胞毒作用,且远远高于IC50值,提示该有效部位给药浓度有较大的安全范围。迁移实验结果显示,MCF-7细胞的迁移距离随给药浓度的升高而减少,提示三叶青有效部位可明显抑制MCF-7细胞的迁移能力。细胞周期可反映细胞的增殖状态,分析流式细胞仪结果可知,三叶青有效部位可将MCF-7细胞阻滞于S和G2/M期,并诱导细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤生长的作用。
综上所述,三叶青有效部位对MCF-7细胞的增殖和迁移有抑制作用,且用药安全范围广,其作用机理可能阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡有关。
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